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    遇到超高效液相色譜儀的故障一文搞定

    更新時間:2023-02-03      點擊次數:859
      超高效液相色譜借助于HPLC(高效液相色譜)的理論及原理,涵蓋了小顆粒填料、非常低系統體積及快速檢測手段等技術,增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量。
      超高效液相色譜儀使用時遇到以下故障應該怎么處理
      1.基線漂移偏大
      (1)柱溫波動:控制好柱子和流動相的溫度。
      (2)流通池被污染或有氣泡:用甲醇或其他強極性溶劑沖洗流通池。
      (3)檢測器出現阻塞,高壓造成流通池窗口破裂,產生噪音基線:取出阻塞物或更換管子,更換流通池窗需參考檢測器手冊。
      (4)柱平衡慢:特別是流動相發生變化時,用中等強度的溶劑沖洗,提前預約客戶,在分析前用10~20倍體積的新流動相對柱子進行沖洗。
      (5)流動相污染、變質或由低純度溶液配成:使用高品質的化學試劑及高效液相色譜(HPLC)級的溶劑。
      (6)樣品中有強保留的物質(高K′值)以饅頭峰樣被洗脫出,從而表現出一個逐步升高的基線:使用保護柱,如有必要,在進樣之間或在分析過程中,用強溶劑沖洗柱子。
      (7)流動相不均勻、配比不當或流速有變化:在配制流動相時應充分搖勻,同時要根據目標分離物和流動相的極性合理配比,并保持流速恒定。
      (8)柱子平衡時間短:HPLC色譜柱根據使用環境不同,平衡時間通常要控制在(30~60)min。
      (9)檢測器沒有設定在吸收波長處:檢測器沒有設定在吸收波長處不僅影響檢測器的靈敏度和結果的度,還會使基線漂移加大,應該將檢測器設定在吸收波長處。
      2.噪聲偏大
      (1)在流動相、檢測器或泵中有空氣:流動相脫氣,并沖洗系統以除去檢測器或泵中的空氣。
      (2)管路漏液:檢查管路接頭是否松動,泵是否漏液,是否有鹽析出和不正常的噪音。
      (3)流動相污染、變質或有低純度溶液配制:使用高品質的化學試劑及HPLC級的溶劑。
      (4)溫度差異影響(柱溫過高,檢測器未加熱):減少差異或加上熱交換器。
      (5)在同一條線上有其他電子設備:斷開LC、檢測器和記錄儀,檢查干擾是否來自于外部,加以更正。
      (6)檢測器/ 記錄儀電子元件的問題:斷開檢測器和記錄儀的電源,檢查并更正。
      (7)泵震動:在系統中加入脈沖阻尼器。
      (8)檢測器燈能量不足:更換燈。
      (9)色譜柱填料流失或阻塞:更換色譜柱。
      3.重復性偏大
      (1)峰型不佳(如峰拖尾、峰寬較大、分裂峰等都不利于峰面積的計算,造成重復性偏大):可以改變色譜柱條件,改變溫度、流速等參數,以獲得較尖銳的峰型,利于積分的性。
      (2)泵流速不穩:可以根據泵流速檢定情況作出判斷,泵流速的穩定性對峰面積的重復性影響非常大。例如:在其他條件不變的情況下,將流速由1.0mL/min改為0.5mL/min,結果保留時間加倍,峰面積也加倍,也可以看出峰面積在一定條件下基本與流速成反比。
      (3)色譜柱影響:色譜柱固定相的流失,以及色譜柱對標樣的吸收等都會影響檢測結果;特殊情況下還會發生柱子對樣品的不可逆吸收,建議使用替代柱。
      (4)柱溫有變化:柱溫對保留時間有顯著影響,保留時間的變化直接影響積分面積的大小。因此應保持柱溫恒定。
      (5)進樣器漏液:進樣器漏液導致進入色譜柱的樣品量發生變化,進而導致峰面積發生變化,應檢查進樣墊等易損部件以排除漏液。
      (6)樣品本身的影響:樣品降解或溶劑揮發都會導致重復性偏大,應確定方法的性和采取措施控制揮發。
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